Definición de electroforesis
La electroforesis es una técnica de separación que se basa en la movilidad de los iones en un campo eléctrico.
Los iones con carga positiva migran hacia un electrodo negativo y los iones con carga negativa migran hacia un electrodo positivo.Por razones de seguridad, uno de los electrodos suele estar a tierra y el otro está polarizado positiva o negativamente.
Los iones tienen diferentes velocidades de migración dependiendo de su carga total, tamaño y forma, y por lo tanto pueden ser separados.
La técnica se utiliza particularmente para macromoléculas, como las proteínas. Se añade una carga negativa a estas moléculas para que se desplacen hacia el electrodo positivo.
Un aparato de electrodos consiste en un suministro de alto voltaje, electrodos, tampón y un soporte para el tampón como papel de filtro, tiras de acetato de celulosa, gel de poliacrilamida o un tubo capilar.
Los tubos capilares abiertos se utilizan para muchos tipos de muestras y los otros soportes suelen utilizarse para muestras biológicas como mezclas de proteínas o fragmentos de ADN.Una vez completada la separación, el soporte se tiñe para visualizar los componentes separados.
La resolución puede mejorarse en gran medida utilizando el enfoque isoeléctrico.En esta técnica el gel del soporte mantiene un gradiente de pH.A medida que una proteína migra por el gel, alcanza un pH que es igual a su punto isoeléctrico.A este pH la proteína es neutra y ya no migra, es decir, se concentra en una banda nítida en el gel.
Técnicas electroforéticas específicas
- Electroforesis de disco
- Electroforesis capilar
- Electroforesis en gel electroforesis