Définition de l’électrophorèse
L’électrophorèse est une technique de séparation qui repose sur la mobilité des ions dans un champ électrique.
Les ions chargés positivement migrent vers une électrode négative et les ions chargés négativement migrent vers une électrode positive.Pour des raisons de sécurité, une électrode est généralement à la masse et l’autre est polarisée positivement ou négativement.
Les ions ont des vitesses de migration différentes selon leur charge totale, leur taille et leur forme, et peuvent donc être séparés.
Cette technique est notamment utilisée pour les macromolécules, comme les protéines. Une charge négative est ajoutée à ces molécules afin qu’elles se déplacent vers l’électrode positive.
Un appareil à électrodes se compose d’une alimentation haute tension, d’électrodes, d’un tampon et d’un support pour le tampon tel que du papier filtre, des bandes d’acétate de cellulose, un gel de polyacrylamide ou un tube capillaire.
Les tubes capillaires ouverts sont utilisés pour de nombreux types d’échantillons et les autres supports sont généralement utilisés pour des échantillons biologiques tels que des mélanges de protéines ou des fragments d’ADN.Après une séparation, le support est coloré pour visualiser les composants séparés.
La résolution peut être grandement améliorée en utilisant la focalisation isoélectrique.Dans cette technique, le gel de support maintient un gradient de pH.Lorsqu’une protéine migre le long du gel, elle atteint un pH égal à son point isoélectrique.A ce pH, la protéine est neutre et ne migre plus, c’est-à-dire, elle est focalisée en une bande nette sur le gel.
Techniques électrophorétiques spécifiques
- électrophorèse sur disque
- électrophorèse capillaire
- électrophorèse sur gel. électrophorèse
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