L’hypertrophie du ligamentum flavum dans la sténose de la colonne lombaire est associée à une augmentation du niveau de miR-155
Abstract
L’hypertrophie du ligamentum flavum (LF) contribue à la sténose de la colonne lombaire (LSS) et est principalement causée par la fibrose. Des données récentes indiquent que le miR-155 joue un rôle crucial dans la pathogenèse de différentes maladies fibrotiques. Cette étude visait à tester l’hypothèse selon laquelle le miR-155 exerce des effets sur l’épaisseur du LF en régulant l’expression du collagène. Nous avons constaté que l’épaisseur des LF et l’expression du collagène I et, du collagène III étaient plus élevées dans les LF de patients atteints de SLA que dans les LF de patients atteints de hernie discale lombaire (LDH) (). L’expression de miR-155 était significativement plus élevée dans les LF du groupe LSS que dans les LF du groupe LDH (). Le niveau de miR-155 était positivement corrélé avec l’épaisseur des LF (, ), le niveau de collagène de type I (, ), et le niveau de collagène de type III (, ). La mimique de miR-155 a augmenté l’expression de l’ARNm et de la protéine du collagène I et du collagène III dans les fibroblastes isolés des LF, tandis que l’éponge de miR-155 a diminué l’expression de l’ARNm et de la protéine du collagène I et III dans les fibroblastes. En conclusion, miR-155 est un miRNA associé à la fibrose et peut jouer un rôle important dans la pathogenèse de l’hypertrophie de la FL.
1. Introduction
La sténose spinale lombaire (LSS) est une affection fréquente chez les patients âgés. La LSS est définie comme le rétrécissement du canal rachidien avec un empiètement sur la moelle ou la racine nerveuse qui entraîne les symptômes de radiculopathie ou de pseudoclaudication . L’hypertrophie du ligamentum flavum (LF) est généralement impliquée dans la pathogenèse du LSS, ce qui peut réduire le diamètre du canal rachidien et comprimer le sac dural et les racines nerveuses, entraînant des symptômes, même en l’absence d’un annulus fibrosus bombé ou d’un noyau pulposus hernié ou d’éperons osseux .
Le LF est une structure élastique bien définie qui se compose de fibres élastiques (80 %) et de fibres de collagène (20 %) . Les tissus LF hypertrophiés deviennent désorganisés et présentent des niveaux réduits et une dégénérescence des fibres élastiques mais des niveaux accrus de fibres de collagène . Au cours de l’hypertrophie des FL, on observe une augmentation de l’expression et de l’activité de diverses molécules, notamment les métalloprotéases matricielles (MMP) , les inhibiteurs tissulaires des métalloprotéases matricielles (TIMP) , le facteur de croissance dérivé des plaquettes B (PDGF-BB) , le facteur de croissance du tissu conjonctif (CTGF) , la protéine morphogénétique osseuse (BMP) et les cytokines inflammatoires .
Les microARN (miRNA) sont des molécules d’ARN non codantes monocaténaires conservées au cours de l’évolution, de 19 à 24 nucléotides, qui contrôlent l’expression des gènes au niveau posttranscriptionnel. Les signatures d’expression des miRNA ont été associées aux caractéristiques clinicopathologiques et aux résultats de différentes maladies . Cependant, on sait très peu de choses sur le rôle des miARN dans l’hypertrophie de la FL. Les miARN jouent un rôle crucial dans la dégradation et la fibrose des tissus. Les miARN pourraient favoriser la dégradation du cartilage en régulant l’expression des gènes codant pour des facteurs cataboliques tels que MMP et ADAMTS. Notamment, une augmentation significative de l’expression du miR-155 a été observée dans les cellules fibroblastiques et les tissus de patients atteints de polyarthrite rhumatoïde. MiR-155 est un miRNA multifonctionnel typique qui joue un rôle crucial dans divers processus physiologiques et pathologiques, tels que la différenciation de la lignée hématopoïétique, l’immunité, le cancer, les maladies cardiovasculaires et la réponse inflammatoire .
Dans cette étude, nous avons cherché à explorer le rôle potentiel de miR-155 dans le développement de l’hypertrophie de la FL chez les patients atteints de LSS. Nous avons comparé l’épaisseur, la dégradation de l’élastine, la fibrose, l’expression du collagène I et du collagène III, et l’expression du miR-155 dans les LF de patients atteints de LSS à ceux de patients atteints de hernie discale lombaire (LDH). Ensuite, nous avons étudié la corrélation entre le niveau de miR-155 et les caractéristiques des LF. Enfin, nous avons examiné les effets du miR-155 sur l’expression du collagène de types I et III dans les cellules FL humaines en culture.
2. Méthodes
2.1. Spécimens
Des échantillons de FL ont été obtenus chez 15 patients (7 hommes, 8 femmes, âge moyen : 65,67 ans, fourchette : 63-71 ans) qui ont subi une laminectomie décompressive en raison d’une sténose rachidienne lombaire dégénérative symptomatique. Comme contrôle, des échantillons de FL ont été obtenus chez 15 patients (10 hommes, 5 femmes, âge moyen : 25,17 ans, fourchette : 20-30 ans) souffrant d’une hernie discale lombaire et ayant subi une intervention chirurgicale pour ce trouble. Les LF ont été prélevées à partir de L4/5 puis soumises à une coloration histologique, une coloration au trichrome de Masson, une analyse immunohistochimique et une évaluation biologique. L’étude a été approuvée par le comité d’examen éthique institutionnel et un consentement éclairé écrit a été obtenu de chaque patient.
2.2. Mesure de l’épaisseur du LF
L’imagerie par résonance magnétique (IRM) a été réalisée pour mesurer l’épaisseur du LF chez chacun des 30 patients. Sur l’image axiale pondérée en T1 à travers l’articulation de la facette, le LF a été clairement observé comme une masse de faible intensité de signal juste sur le côté ventral de l’articulation de la facette . L’épaisseur maximale du LF a été tracée en utilisant la technique du curseur manuel par un chirurgien expérimenté et mesurée automatiquement dans le système PACS. La mesure de chaque ligament a été répétée trois fois, et la valeur moyenne a été utilisée comme l’épaisseur finale du LF.
2.3. Analyse histologique
Les spécimens ont été coupés de façon sagittale, fixés dans du formol à 10% pendant 48 h, et inclus dans un bloc de paraffine. Des coupes en tranches fines (4 μm) ont été préparées et colorées par coloration à l’hématoxyline et à l’éosine (H&E) et par coloration trichrome de Masson par un pathologiste expérimenté ne connaissant pas l’origine des spécimens. La coloration H&E a révélé la morphologie et la structure du LF et le degré de dégradation de l’élastine. La coloration trichrome de Masson a été utilisée pour identifier la fibre élastique (rose) et la fibre collagène (bleu) et pour déterminer le degré de fibrose .
2.4. PCR en temps réel
L’ARN total a été isolé des échantillons ou des cellules en utilisant TRIZOL (Invitrogen Corp, Carlsbad, CA). Pour mesurer les niveaux d’expression de l’ARNm du collagène de types I et III, l’ADNc a été transcrit de manière inverse à partir de l’ARN isolé en incubant 500 ng d’ARN traité à la DNase avec un kit de synthèse premier brin (Advanced Biotechnologies). La PCR en temps réel a été réalisée en utilisant le colorant vert SYBR dans un thermocycleur avec les paramètres suivants : 40 cycles, 94°C pendant 30 secondes, 60°C pendant 20 secondes et 72°C pendant 15 secondes. Pour mesurer le niveau de miR-155, la RT-PCR a été réalisée avec le kit de détection All-in-One miRNA qRT-PCR (Tiangen). Les amorces suivantes ont été utilisées : collagène I en avant : 5′-GTGCGATGACGTGATCTGTGA-3′, inverse : 5′-CGGTGGTTTCTTGGTCGGT-3′ ; collagène III en sens direct : 5′-GCCAAATATGTCTGTGACTCA-3′ et inverse : 5′-GGGCGAGTAGGAGCAGTTG-3′ ; miR-155 en sens direct : TTAATGCTAATCGTGATAGGGGT. Toutes les amorces ont été synthétisées par Shenggong Inc. Toutes les données ont été analysées en utilisant la méthode comparative ΔΔCT pour calculer la différence entre les valeurs de cycle seuil (CT) des gènes cibles et de référence dans chaque échantillon.
2.5. Analyse Western Blot
Les échantillons de tissus et les cellules en culture ont été lysés dans un tampon RIPA contenant un cocktail d’inhibiteurs de protéases. Des quantités équivalentes de protéines ont été séparées par électrophorèse et transférées sur une membrane de transfert Immobilon-P (Millipore). Les membranes ont été bloquées avec du lait écrémé à 5% dans une solution saline tamponnée au tris, puis incubées avec des anticorps monoclonaux Col 1 ou Col 3 (Abcam, USA), suivis d’une incubation avec un anticorps secondaire conjugué à de la peroxydase de raifort (Abcam, USA). L’actine (Abcam, USA) a été utilisée comme contrôle de charge.
2.6. Culture primaire de cellules fibroblastiques de FL
Les échantillons de FL ont été obtenus de manière aseptique à partir de six jeunes patients subissant une chirurgie spinale. Les spécimens disséqués ont été hachés en petits morceaux et digérés dans un milieu sans sérum (Gibco) contenant 250 U/mL de collagénase de type I (Sigma) à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2. Les spécimens digérés ont été lavés avec un milieu contenant du sérum pour inhiber l’activité de la collagénase, puis placés dans des boîtes de 35 mm dans du milieu Eagle modifié de Dulbecco et du milieu F-12 de Ham (DMEM/F12, Gibco) complété par 10 % de sérum bovin fœtal inactivé à la chaleur (FBS, Gibco-BRL). Les cultures ont été incubées à 37°C dans une atmosphère humidifiée contenant 5% de CO2. Le milieu a été changé tous les deux jours. Après deux semaines, les cellules ont commencé à migrer à partir des copeaux de ligament et ont formé une monocouche. Les cellules ont été maintenues pendant deux à trois semaines dans du DMEM/F12 contenant 10% de FBS, 1% v/v de pénicilline et de la streptomycine (Sigma) dans un incubateur avec une atmosphère humidifiée contenant 5% de CO2. Les niveaux d’expression protéique du collagène de types I et III ont été détectés par immunocytochimie comme décrit précédemment .
2.7. Construction du vecteur
La séquence du précurseur de hsa-miR-155 a été obtenue à partir de miRBase (http://www.mirbase.org/) : CTGTTAATGCTAATCGTGATAGGGGTTTGCCTCCAACTGACTCACATATTAGCATTAACAG. La séquence de hsa-miR-155 était UUAAUGCUAAUUGUGAUAGGGGU, et la séquence d’ADN complémentaire était ACCCCTATCACAATTAGCATTAA. Les éponges miR-155 ont été conçues comme trois séquences complémentaires incomplètes. Les oligos ont été clonés dans pCDH-GFP pour fabriquer le plasmide pCDH-miR-155 ou pCDH-miR-155-éponges.
2.8. Conditionnement du lentivirus et infection
Pour la transfection, les cellules 293T ont été cultivées à 37°C dans un incubateur à 5% de CO2 jusqu’à ce que les cellules atteignent 70-80% de confluence, et les cellules monocouches ont été transfectées avec PCDH-GFP, pCDH-miR-155 ou pCDH-miR-155-sponge plasmid mélangé avec psPAX2 et pMD en utilisant des liposomes. Le milieu de culture a été jeté après 4 h, et les cellules ont été lavées 3 fois avec du PBS. Enfin, 15 ml de milieu de culture cellulaire contenant 10 % de sérum bovin fœtal ont été ajoutés et les cellules ont été cultivées pendant 24 h. Ensuite, les surnageants contenant les lentivirus GFP (groupe vide), miR-155 (groupe OE) ou miR-155 éponge (groupe Sponge) ont été recueillis et utilisés pour infecter les cellules fibroblastes. Un autre lentivirus contenant un miRNA non-sens a été utilisé comme contrôle (groupe CON).
2.9. Analyse statistique
Les données ont été exprimées en moyenne ± SD et analysées à l’aide du progiciel d’analyse statistique SPSS version 12 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Les mesures de l’épaisseur du LF ont été comparées en utilisant le test t de student. Les différences dans les niveaux d’expression du collagène I, du collagène III, de l’ARNm et des protéines, ainsi que le niveau de miR-155 entre les groupes ont été évaluées par une ANOVA à sens unique. Les corrélations entre l’épaisseur du LF, le collagène I, le collagène III et les niveaux de miR-155 ont été analysées par la méthode de Spearman. a été considéré comme statistiquement significatif.
3. Résultats
3.1. Épaisseur du LF
L’épaisseur de la partie médiane du LF a été mesurée. L’épaisseur moyenne du LF était de 2,8 ± 0,7 mm (plage : 1,63-3,87 mm) dans le groupe LDH et de 5,3 ± 1,0 mm (plage : 3,95-7,48 mm) dans le groupe LSS. Cette différence était significative ().
3.2. Dégradation de l’élastine et fibrose des LF
L’analyse histologique a montré que la zone de fibres élastiques a diminué et la zone de collagène a augmenté dans les LF du groupe LSS, par rapport au groupe LDH. Dans le groupe LDH, les fibres élastiques riches étaient disposées en ordre parallèle (Figures 1(a) et 1(b)). Cependant, dans le groupe LSS, les fibres élastiques étaient fragmentées, désorganisées et perdues de manière focale, accompagnées par la prolifération de fibres de collagène (Figures 1(c) et 1(d)). La coloration au trichrome de Masson a montré que, dans les LF du groupe LDH, une grande zone était colorée en rose et présentait une disposition régulière, indiquant un état normal non fibrotique (Figures 1(e) et 1(f)), mais dans les LF, du groupe LSS, une grande zone était colorée en bleu, indiquant la présence d’une fibrose massive (Figures 1(g) et 1(h)).
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Analyse histologique des échantillons de LF des patients LSS et LDH. (a) Dans les LF des patients LDH, une large zone était colorée en rose avec une disposition régulière, indiquant un état normal et non fibrotique. Coloration H&E ×40. (b) FL de patients atteints de LDH. H&Coloration E ×100. (c) Dans les LF de patients atteints de SLS, les fibres élastiques étaient désorganisées et perdues de façon focale, accompagnées d’une prolifération de fibres de collagène. Les fibres élastiques présentaient également de faibles volumes et des diamètres inégaux. Coloration H&E ×40. (d) FL de patients atteints de SLA. H&Coloration E ×100. (e) Dans les LF de patients atteints de LDH, les fibres élastiques riches étaient régulièrement disposées. Dans le grade 0, <% de la surface du LF était colorée en bleu. Coloration trichrome de Masson ×40. (f) LF de patients atteints de LDH. Dans le grade 1, <40% de la zone du LF était colorée en bleu. Coloration trichrome de Masson ×40. (g) Dans les LF de patients LSS, une large zone était colorée en bleu, indiquant la présence d’une fibrose massive. Au grade 3, plus de 60 % de la zone entière était colorée en bleu. Coloration trichrome de Masson ×40. (h) Dans les LF de patients atteints de SLA, au grade 4, plus de 80 % de la zone entière était colorée en bleu. Coloration trichrome de Masson ×40.
3.3. Expression des collagènes I et III dans les LF
Les niveaux d’expression de l’ARNm des collagènes I et III ont été augmentés de manière significative dans les échantillons de LF du groupe LSS (figure 2(a)). L’expression des protéines des collagènes I et III est plus élevée dans les échantillons de LF du groupe LSS que dans ceux du groupe LDH (Figures 2(b) et 2(c)).
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L’expression du collagène I et du collagène III dans les spécimens de LF des patients LSS et LDH. (a) L’analyse PCR en temps réel a montré que les niveaux relatifs d’ARNm du collagène I et du collagène III dans les LF étaient significativement plus élevés dans le groupe LSS que dans le groupe LDH. (b) Analyse Western blot de l’expression du collagène I et du collagène III dans les LF des groupes LSS et LDH. (c) Les niveaux relatifs de protéines du collagène I et du collagène III dans le LF étaient significativement plus élevés dans le groupe LSS que dans le groupe LDH.
3.4. Niveau de miR-155 dans le LF
Le niveau moyen de miR-155 était de 1.1748 ± 0,047 (intervalle : 1,1278-1,2218) dans le groupe LDH et 5,1081 ± 0,703 (intervalle : 4,4051-5,8111) dans le groupe LSS. Le niveau de miR-155 était significativement plus élevé dans les échantillons de LF du groupe LSS que dans ceux du groupe LDH (, Figure 3(a)). L’analyse de corrélation a montré que le niveau de miR-155 a augmenté en parallèle avec l’épaisseur du LF, montrant une corrélation positive et significative. Le coefficient de régression était de 0,958 (Figure 3(b)). De plus, l’expression du collagène de type I et III a montré une corrélation positive et significative avec le niveau de miR-155 dans le LF (Figure 3(c)). Les coefficients de régression étaient de 0,827 () et 0,825 () pour le collagène de type I et III, respectivement.
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L’expression de miR-155 dans les spécimens de LF provenant de patients atteints de SLA et de LDH. (a) Le niveau relatif de miR-155 dans les LF était plus élevé dans le groupe LSS que dans le groupe LDH. (b) Corrélation entre le niveau de miR-155 et l’épaisseur du LF. (c) Diagramme de dispersion montrant les corrélations positives entre le niveau de miR-155 et les niveaux de protéines de collagène I/III dans les LF. Les coefficients de corrélation étaient respectivement de 0,825 () et 0,827 ().
3.5. Le miR-155 régule à la hausse l’expression des collagènes I et III dans les fibroblastes de la FL
Pour déterminer le rôle du miR-155 dans la régulation de l’expression des collagènes de types I et III dans la FL, nous avons isolé des fibroblastes de la FL et les avons infectés avec des lentivirus. L’analyse RT-PCR a montré que l’expression de l’ARNm du collagène de types I et III était augmentée dans les cellules infectées par le lentivirus mimétique du miR-155 par rapport aux contrôles (Figure 4(a)). L’analyse Western blot a montré que l’expression protéique du collagène de types I et III était augmentée dans les cellules infectées par le lentivirus mimétique du miR-155 par rapport aux contrôles (Figures 4(b) et 4(c)). L’immunocytochimie a confirmé que la coloration du collagène de types I et III était manifestement plus forte dans les cellules infectées par le lentivirus mimétique miR-155 par rapport aux contrôles (Figures 4(d)-4(g)).
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miR-155 mimétique augmente l’expression du collagène I et du collagène III dans les fibroblastes isolés de LF. (a) L’analyse PCR en temps réel a montré que les niveaux relatifs d’ARNm du collagène I et du collagène III étaient significativement plus élevés dans le groupe OE que dans les groupes Blanc et Contrôle. (b) Analyse Western blot de l’expression du collagène I et du collagène III dans différents groupes de fibroblastes. (c) Les niveaux protéiques relatifs du collagène I et du collagène III étaient significativement plus élevés dans le groupe OE que dans les groupes vierge et témoin. (d) Groupe vierge. (e) Groupe témoin. (f) Coloration immunocytochimique du collagène I dans le groupe OE. (g) Coloration immunocytochimique du collagène III dans le groupe OE. Le marron indique une coloration positive.
En revanche, l’expression de l’ARNm du collagène de types I et III était diminuée dans les cellules infectées par le lentivirus éponge miR-155 par rapport aux contrôles (Figure 5(a)). De même, l’analyse Western blot a montré que l’expression protéique du collagène de types I et III était réduite dans les cellules infectées par le lentivirus éponge miR-155 par rapport aux contrôles (Figures 5(b) et 5(c)). L’immunocytochimie a confirmé que la coloration du collagène de types I et III était plus faible dans les cellules infectées par le lentivirus éponge miR-155 par rapport aux contrôles (Figures 5(d)-5(g)).
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miR-155 éponge diminue l’expression du collagène I et du collagène III dans les fibroblastes isolés de LF. (a) L’analyse PCR en temps réel a montré que les niveaux relatifs d’ARNm du collagène I et du collagène III étaient significativement plus faibles dans le groupe éponge que dans les groupes blanc et témoin. (b) Analyse Western blot de l’expression du collagène I et du collagène III dans différents groupes de fibroblastes. (c) Les niveaux protéiques relatifs du collagène I et du collagène III étaient significativement plus faibles dans le groupe éponge que dans les groupes vierge et témoin. (d) Groupe vierge. (e) Groupe témoin. (f) Coloration immunocytochimique du collagène I dans le groupe éponge. (g) Coloration immunocytochimique du collagène III dans le groupe éponge. Le marron indique une coloration positive.
4. Discussion
LF contient une concentration élevée d’élastine, permettant la contraction pendant la flexion et l’allongement pendant l’extension . L’hypertrophie des FL est connue pour causer le LSS, conduisant à des douleurs lombaires . Dans cette étude, nous avons constaté que l’épaisseur moyenne du LF dans le groupe LSS était significativement plus grande que celle du groupe LDH. Nous avons également observé une disposition irrégulière, une rupture, un gonflement et une diminution des fibres élastiques, une hyalinisation et une augmentation du nombre de fibres de collagène dans le LF du groupe LSS. De plus, nous avons constaté que les LF du groupe LSS présentaient un score de fibrose élevé. Ces résultats sont cohérents avec les études précédentes montrant une augmentation de la teneur en collagène (fibrose) et une diminution du ratio élastine/collagène dans les LF hypertrophiées.
À notre connaissance, il s’agit du premier rapport décrivant la relation entre l’hypertrophie des LF et l’expression des miARN. Des études récentes ont révélé un rôle important du miR-155 dans la pathogenèse de l’ostéoarthrite et des maladies fibrotiques . Ici, nous nous sommes concentrés sur le rôle du miR-155 dans la pathogenèse de l’hypertrophie de la FL. Nous avons constaté que le miR-155 était significativement régulé à la hausse dans les tissus de la FL des patients atteints de LSS par rapport aux patients atteints de LDH. Une analyse de corrélation a montré que l’augmentation de l’expression de miR-155 était corrélée à l’épaisseur, au score fibrotique et à l’expression du collagène de type I et III dans les LF. De plus, nous avons isolé des fibroblastes de FL et montré que miR-155 régulait à la hausse l’expression du collagène de type I et de type III dans ces cellules.
L’inflammation chronique est un facteur de risque important pour l’hypertrophie de la FL. La progression de l’hypertrophie de la FL s’accompagne d’un degré élevé d’infiltration des macrophages . En outre, les macrophages ont été identifiés comme une source cellulaire majeure de cytokines inflammatoires dans l’hypertrophie de la FL . Récemment, le miR-155 a été identifié comme un composant de la réponse primaire des macrophages aux médiateurs inflammatoires. En outre, plusieurs études ont montré que le facteur de croissance transformant (TGF-) est impliqué dans le processus des changements hypertrophiques au cours de la FL. Il est intéressant de noter que le miR-155 est une cible directe de la voie TGF-/Smad, qui induit l’expression du miR-155 par l’intermédiaire de Smad4. Le miR-155 contribue à la régulation de la voie TGF-/Smad en ciblant directement SMAD2 et SMAD5. Ces résultats établissent un lien fort entre miR-155, la voie TGF- et l’hypertrophie de la FL et indiquent que miR-155 est un facteur critique qui régule la fibrose des fibroblastes et l’hypertrophie de la FL.
La présente étude comporte plusieurs limites. Premièrement, la taille de notre échantillon a été limitée par le comité d’examen éthique. Deuxièmement, nous n’avons pas pu collecter des FL normaux et avons plutôt utilisé des échantillons témoins de patients souffrant d’hernies discales, dont l’âge moyen était significativement plus jeune que celui des patients atteints de sténose spinale. Par conséquent, nous ne pouvons pas exclure la possibilité que le vieillissement puisse avoir un impact sur l’expression du miR-155. Il aurait été idéal d’avoir deux contrôles différents : des spécimens appariés en âge et en sexe de patients sans sténose et des spécimens appariés en sexe de jeunes adolescents. Dans le premier cas, on aurait éliminé l’âge comme variable indépendante, puisque tous les patients âgés ne développent pas une sténose spinale. Il se peut que, comme pour l’athérosclérose, une prédisposition génétique modifie les facteurs biochimiques qui contribuent à l’état pathologique. Des spécimens d’adolescents en fin d’adolescence qui ne présentent aucun changement dégénératif nous permettraient de déterminer l’étendue des perturbations survenant dans la sténose spinale. Malheureusement, ces deux témoins idéaux subissent rarement un traitement chirurgical, ce qui rend presque impossible la collecte d’un nombre suffisant d’échantillons en temps voulu. Nous avons donc finalement opté pour nos témoins actuels. Même s’il est vrai qu’ils ne sont pas idéaux, ils sont raisonnables et adéquats pour tester l’hypothèse que nous avons postulée dans cette étude. En fait, dans les littératures sur l’hypertrophie du ligamentum flavum, le groupe des jeunes hernies discales a souvent été utilisé comme groupe témoin .
5. Conclusions
En résumé, nous avons constaté que le miR-155 était régulé à la hausse chez les patients atteints d’hypertrophie du ligamentum flavum lombaire. Le niveau d’expression du miR-155 était corrélé avec l’épaisseur et le degré de fibrose du LF. Le miR-155 a augmenté l’expression du collagène de types I et III dans les fibroblastes du LF. Ces données suggèrent que le miR-155 est un miARN associé à la fibrose et peut jouer un rôle important dans la pathogenèse de l’hypertrophie de la FL.
Conflit d’intérêts
Les auteurs déclarent qu’il n’y a pas de conflit d’intérêts concernant la publication de cet article.
Contribution des auteurs
Jianwei Chen et Zhanchun Li ont conçu l’étude et rédigé l’article. Jianwei Chen, Guibin Zhong, Lie Qian, Zhanchun Li, Zhiguang Qiao, Bin Chen et Hantao Wang ont réalisé les expériences et analysé les données. Tous les auteurs ont lu et approuvé le document final.
Remerciements
Les auteurs remercient le Dr Zhiguang Qiao pour son travail préliminaire à cette étude et remercient le Centre de recherche biomédicale de l’hôpital Renji, École de médecine, Université Jiaotong de Shanghai, pour l’utilisation des instruments. Cette étude a été soutenue par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (81370976) et la Fondation des sciences naturelles de Shanghai, Chine (13zr1424900).