Definitie van elektroforese
Electroforese is een scheidingstechniek die is gebaseerd op de mobiliteit van ionen in een elektrisch veld.
Positief geladen ionen migreren naar een negatieve elektrode en negatief geladen ionen migreren naar een positieve elektrode.Om veiligheidsredenen staat één elektrode meestal aan massa en is de andere positief of negatief beïnvloed.
Ionen hebben verschillende migratiesnelheden, afhankelijk van hun totale lading, grootte en vorm, en kunnen daarom worden gescheiden.
De techniek wordt vooral gebruikt voor macromoleculen, zoals eiwitten. Aan deze moleculen wordt een negatieve lading toegevoegd, zodat ze naar de positieve elektrode bewegen.
Een elektrode-apparaat bestaat uit een hoogspanningsvoeding, elektroden, buffer, en een drager voor de buffer, zoals filtreerpapier, celluloseacetaatstroken, polyacrylamidegel, of een capillair buisje.
Open capillaire buisjes worden voor vele soorten monsters gebruikt en de andere dragers worden gewoonlijk gebruikt voor biologische monsters zoals eiwitmengsels of DNA-fragmenten.Nadat een scheiding is voltooid, wordt de drager gekleurd om de gescheiden componenten zichtbaar te maken
De resolutie kan sterk worden verbeterd met behulp van iso-elektrische focussering.Bij deze techniek houdt de ondersteunende gel een pH-gradiënt aan.Terwijl een eiwit door de gel migreert, bereikt het een pH die gelijk is aan zijn iso-elektrisch punt.Bij deze pH is het eiwit neutraal en migreert het niet langer, d.w.z., het wordt geconcentreerd in een scherpe band op de gel.
Specifieke elektroforetische technieken
- schijfelektroforese
- capillaire elektroforese
- gel elektroforese