Definição de Electroforese
Electroforese é uma técnica de separação que se baseia na mobilidade dos iões num campo eléctrico.
Iões com carga positiva migram para um eléctrodo negativo e os iões com carga negativa migram para um eléctrodo positivo.Por razões de segurança, um eléctrodo está geralmente no solo e o outro está enviesado positiva ou negativamente.
Os iões têm diferentes taxas de migração dependendo da sua carga total, tamanho e forma, e podem por isso ser separados.
A técnica é utilizada particularmente para macromoléculas, tais como proteínas. Adiciona-se uma carga negativa a estas moléculas para que se movam em direcção ao eléctrodo positivo.
Um aparelho de eléctrodo consiste numa fonte de alta tensão, eléctrodos, tampão, e um suporte para o tampão, tal como papel filtro, tiras de acetato de celulose, gel de poliacrilamida, ou um tubo capilar.
Tubos capilares abertos são utilizados para muitos tipos de amostras e os outros suportes são normalmente utilizados para amostras biológicas tais como misturas de proteínas ou fragmentos de ADN.Após uma separação completa, o suporte é corado para visualizar os componentes separados.
Resolução pode ser muito melhorada utilizando focalização isoeléctrica. Nesta técnica o gel de suporte mantém um gradiente de pH. À medida que uma proteína migra para baixo do gel, atinge um pH igual ao seu ponto isoeléctrico.A este pH a proteína é neutra e já não migra, ou seja concentra-se numa faixa afiada sobre o gel.
técnicas electroforéticas específicas
- electroforese de discos
- electroforese capilar
- gel electroforese
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