Determinación del palmitato de retinilo (vitamina A) en la leche líquida fortificada mediante cromatografía líquida: estudio colaborativo

Se desarrolló un método de cromatografía líquida (CL) para la medición rápida y sencilla del palmitato de retinilo (vitamina A) en la leche fortificada. Se añadió un estándar interno de acetato de retinilo a una porción de leche de prueba, seguido de una extracción en hexano. El extracto de hexano se analizó por LC utilizando una columna de gel de sílice de fase normal equilibrada con la fase móvil (hexano-isopropanol condicionado, 99,85 + 0,15, v/v) aproximadamente una hora antes de las inyecciones. La concentración de palmitato de retinilo se calculó utilizando un factor de respuesta relativo determinado con estándares de calibración. En el estudio colaborativo, 11 laboratorios analizaron 13 pares de materiales de leche fluida por duplicado ciego. Doce de los materiales estaban compuestos por leche descremada (< 0,5% de grasa), leche con 1% de grasa, leche con 2% de grasa y leche de chocolate con 1% de grasa. Cada material fue fortificado con 3 concentraciones de palmitato de retinilo de aproximadamente 581 microg/L (1000 IU/qt), 1163 microg/L (2000 IU/qt), y 2236 microg/L (4000 IU/qt). El decimotercer material, leche desnatada no enriquecida, sirvió como blanco de la matriz. Las desviaciones estándar de repetibilidad (RSDr) sin valores atípicos oscilaron entre el 1,5 y el 5,7% y las desviaciones estándar de reproducibilidad (RSDR) sin valores atípicos oscilaron entre el 5,0 y el 22,7%. Los isómeros cis coeluyeron con el isómero predominante de palmitato de trans-retinilo y se incluyeron en los resultados comunicados por todos los laboratorios colaboradores. Los ésteres endógenos de cadena larga de la grasa láctea también se midieron con el aditivo de palmitato de retinilo. El Director del Estudio recomienda que se adopte este método para la determinación del palmitato de retinilo en la leche líquida por LC Primera Acción.