Determinação de palmitato de retinilo (vitamina A) em leite líquido fortificado por cromatografia líquida: estudo colaborativo

Foi desenvolvido um método cromatográfico líquido (LC) para medição rápida e simples de palmitato de retinilo (vitamina A) em leite fortificado. O padrão interno de acetato de retinilo foi adicionado a uma porção de teste de leite seguida de extracção em hexano. O extracto de hexano foi analisado por LC usando uma coluna de sílica gel de fase normal equilibrada com fase móvel (hexano-isopropanol condicionado, 99,85 + 0,15, v/v) cerca de 1 h antes das injecções. A concentração de palmitato de retinilo foi calculada usando um factor de resposta relativa determinado com padrões de calibração. No estudo colaborativo, 11 laboratórios analisaram 13 pares de materiais de leite fluido em duplicado cego. Doze dos materiais foram compostos por leite desnatado (< 0,5% gordura), 1% leite gordo, 2% leite gordo, e 1% leite gordo com chocolate. Cada material foi fortificado a 3 concentrações de palmitato de retinil de aproximadamente 581 microg/L (1000 IU/qt), 1163 microg/L (2000 IU/qt), e 2236 microg/L (4000 IU/qt). O 13º material, leite desnatado não fortificado, serviu como uma matriz em branco. Os desvios padrão de repetibilidade (RSDr) sem aberrações variaram de 1,5 a 5,7% e os desvios padrão de reprodutibilidade (RSDR) sem aberrações variaram de 5,0 a 22,7%. cis-Isómeros co-elutados com o isómero predominante de palmitato de transretinil e foram incluídos nos resultados relatados por todos os laboratórios colaborativos. Os ésteres endógenos de cadeia longa da gordura do leite também foram medidos com o aditivo palmitato de retinilo. O Director do Estudo recomenda que este método de determinação do palmitato de retinilo no leite fluido por LC seja adoptado Primeira Acção.