Définition et normalisation des endotoxines

(b) la spécificité de la réponse des métazoaires aux LPS (via TLR4) est distincte des autres réponses (comme aux porines qui activent TLR2 ou aux flagelles qui activent TLR5)

(c) elle comprend le rôle de l’endotoxine dans la création et le maintien de l’asymétrie de la MO en proportion des PL

(d) son existence en tant que structure singulière séparée et adjacente aux autres structures de la MO fournit un contraste en termes de structure, fonction et de réaction immunitaire (activation des TLR).

Il faut s’efforcer de développer de nouveaux tests pour détecter les constituants membranaires non-LPS significatifs. Cela constitue une distinction critique. Plutôt que de concevoir une « endotoxine naturelle » composée de constituants non purifiés de la « paroi cellulaire » dont seule l’endotoxine peut être détectée, les constituants individuels (endotoxine, phospholipides, porines, flagelline, etc.) devraient avoir leurs propres tests et normes comme moyen d’élargir les capacités de contrôle de la contamination microbiologique. Cela fournirait la redondance nécessaire, alors qu’aujourd’hui, tout le poids de la détection des artefacts bactériens gram-négatifs subcellulaires repose sur l’endotoxine.

Des normes appropriées pour les tests d’impuretés constituent une partie importante des tests analytiques. Selon l’USP <>, un mélange d’impuretés étiqueté comme  » endotoxine naturelle  » n’est pas une endotoxine, mais un mélange pouvant contenir des endotoxines, des protéines, des phospholipides, des acides nucléiques et des porines. Les tests actuels basés sur le Limulus sont spécifiques de l’endotoxine, et non des constituants de la paroi cellulaire ou du cytoplasme qui ne sont pas des endotoxines ; cette spécificité est inhérente à l’architecture de détection du facteur C du Limulus et du TLR4 des mammifères. La définition de l’endotoxine est une définition transdisciplinaire et ne peut pas être redéfinie de manière fortuite.

1. USP40-NF35 (officielle au 1er mai 2018)

2. Wang X, Quinn, PJ. Lipopolysaccharide : Voie de biosynthèse et modification de la structure. Progress in Lipid Research 2010 ; 49 : 97-107.

3. Ranf S. Immune Sensing of Lipopolysaccharide in Plants and Animals : Same but Different, PLOS Pathogens 2016.

4. Esparza et al. Les complexes endotoxine-albumine transfèrent les monomères d’endotoxine à MD-2, entraînant l’activation de TLR4, Innate Immunity, Innate Immun. 2012. 18(3) : 478-491.

5. Ryu et al. La reconstruction de la cascade de transfert des LPS révèle des déterminants structurels au sein de LBP, CD14 et TLR4-MD2 pour une reconnaissance et un transfert efficaces des LPS. Immunité 2017. 46, 38-50.

6. Berezin et al. Replacing a Century Old Technique – Modern Spectroscopy Can Supplant Gram Staining. Rapports scientifiques 2017. 7 : 3810.

7. Henderson et al. Le pouvoir de l’asymétrie : Architecture et assemblage de la bicouche lipidique de la membrane externe des Gram-négatifs. Annu. Rev. Microbiol. 2016. 70:255-78.

8. Ursell et al. L’analyse de l’expression des protéines de surface révèle le modèle de croissance de la membrane externe des Gram-Negatifs. PLoS Comput Biol. v.8(9) ; 2012 Sept. PMC3459847`

9. Jaroslawski et al. Architecture à haute résolution de la membrane externe de la bactérie Gram-négative Roseobacter denitrificans, Molecular Microbiology 2009. 74(5), 1211-1222.

10. Oestreicher, Taoka, et Fukumori. Une comparaison de la nanostructure de surface de deux types différents de cellules gram-négatives : Escherichia coli et Rhodobacter sphaeroides, Micron 2015. 72, 8-14.

12. Liu et al. Caractérisation immunogénique des porines de la membrane externe OmpC et OmpF d’Escherichia coli pathogène extraintestinal porcin. FEMS Microbiol Lett 2012. 337 : 104-111.

13. Pérez-Toledo M. Les porines OmpC et OmpF de Salmonella Typhi sont des adjuvants puissants pour les antigènes T-dépendants et T-indépendants. Front Immunol. 2017. 8 : 230.