Definizione e standardizzazione dell’endotossina

(b) la specificità della risposta dei metazoi all’LPS (attraverso TLR4) è separata da altre risposte (come alle porine che attivano TLR2 o ai flagelli che attivano TLR5)

(c) essa comprende il ruolo dell’endotossina nel creare e mantenere l’asimmetria dell’OM in proporzione alle PL

(d) la sua esistenza come struttura singolare separata e adiacente ad altre strutture dell’OM fornisce un contrasto in termini di struttura, funzione e reazione immunitaria (attivazione dei TLR).

Si dovrebbero fare sforzi per sviluppare nuovi test per rilevare i costituenti di membrana non-LPS significativi. Questo costituisce una distinzione critica. Piuttosto che ideare una “endotossina naturale” composta da costituenti della “parete cellulare” non purificati di cui si può rilevare solo l’endotossina, i singoli costituenti (endotossina, fosfolipidi, porine, flagelline, ecc.) dovrebbero avere i propri saggi e standard come mezzo per ampliare le capacità di controllo della contaminazione microbiologica. Questo fornirebbe la ridondanza necessaria, mentre oggi tutto il peso del rilevamento degli artefatti batterici subcellulari gram-negativi ricade sull’endotossina.

Standard adeguati per i test di impurità sono una parte importante dei test analitici. Come da USP <>, una miscela di impurità etichettata come “endotossina naturale” non è endotossina, ma una miscela che può contenere endotossine, proteine, fosfolipidi, acidi nucleici e porine. Gli attuali test basati sul Limulus sono specifici per l’endotossina, non per i costituenti della parete cellulare o del citoplasma che non sono endotossine; questa specificità è insita sia nel fattore C del Limulus che nell’architettura di rilevamento del TLR4 dei mammiferi. La definizione di endotossina è una definizione interdisciplinare e non può essere ridefinita casualmente.

1. USP40-NF35 (ufficiale dal 1 maggio 2018)

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