Determinazione del palmitato di retinile (vitamina A) nel latte fluido fortificato mediante cromatografia liquida: studio collaborativo

Un metodo cromatografico liquido (LC) è stato sviluppato per la misurazione rapida e semplice del palmitato di retinile (vitamina A) nel latte fortificato. Lo standard interno dell’acetato di retinile è stato aggiunto a una porzione di latte di prova seguita da estrazione in esano. L’estratto esano è stato analizzato mediante LC utilizzando una colonna di gel di silice in fase normale equilibrata con la fase mobile (esano-isopropanolo condizionato, 99,85 + 0,15, v/v) circa 1 ora prima delle iniezioni. La concentrazione di palmitato di retinile è stata calcolata utilizzando un fattore di risposta relativo determinato con standard di calibrazione. Nello studio collaborativo, 11 laboratori hanno analizzato 13 coppie di materiali di latte fluido in doppio cieco. Dodici dei materiali erano composti da latte scremato (< 0,5% di grassi), latte all’1% di grassi, latte al 2% di grassi e latte al cioccolato all’1% di grassi. Ogni materiale è stato fortificato a 3 concentrazioni di palmitato di retinile di circa 581 microg/L (1000 IU/qt), 1163 microg/L (2000 IU/qt) e 2236 microg/L (4000 IU/qt). Il 13° materiale, latte scremato non fortificato, è servito come matrice in bianco. Le deviazioni standard di ripetibilità (RSDr) senza outlier variavano dall’1,5 al 5,7% e le deviazioni standard di riproducibilità (RSDR) senza outlier variavano dal 5,0 al 22,7%. Gli isomeri cis co-eluiscono con il predominante isomero trans-retinil palmitato e sono stati inclusi nei risultati riportati da tutti i laboratori in collaborazione. Gli esteri a catena lunga endogeni del grasso del latte sono stati misurati anche con l’additivo retinilpalmitato. Il direttore dello studio raccomanda che questo metodo per la determinazione del palmitato di retinile nel latte fluido tramite LC sia adottato Prima azione.