Determination of retinyl palmitate (vitamin A) in fortified fluid milk by liquid chromatography: collaborative study

Opracowano metodę chromatografii cieczowej (LC) do szybkiego i prostego pomiaru palmitynianu retinylu (witaminy A) w mleku wzbogaconym. Wzorzec wewnętrzny octanu retinylu był dodawany do badanej porcji mleka, po czym następowała ekstrakcja do heksanu. Ekstrakt heksanowy był analizowany metodą LC przy użyciu normalnofazowej kolumny z żelem krzemionkowym, kalibrowanej fazą ruchomą (kondycjonowany heksan-izopropanol, 99,85 + 0,15, v/v) około 1 godziny przed iniekcjami. Stężenie palmitynianu retinylu obliczano, stosując współczynnik odpowiedzi względnej określony przy użyciu wzorców kalibracyjnych. W badaniu wspólnym, 11 laboratoriów analizowało 13 par materiałów płynnego mleka w ślepych duplikatach. Dwanaście z tych materiałów składało się z mleka chudego (< 0,5% tłuszczu), mleka o zawartości 1% tłuszczu, mleka o zawartości 2% tłuszczu i mleka czekoladowego o zawartości 1% tłuszczu. Każdy materiał był fortyfikowany przy 3 stężeniach palmitynianu retinylu wynoszących około 581 mikrog/L (1000 IU/qt), 1163 mikrog/L (2000 IU/qt) i 2236 mikrog/L (4000 IU/qt). Materiał 13, niefortyfikowane mleko odtłuszczone, służył jako ślepa próba matrycy. Odchylenia standardowe powtarzalności (RSDr) bez wartości odstających wynosiły od 1,5 do 5,7%, a odchylenia standardowe odtwarzalności (RSDR) bez wartości odstających wynosiły od 5,0 do 22,7%. cis-izomery współwystępowały z dominującym izomerem palmitynianu trans-retinylu i zostały uwzględnione w wynikach przedstawionych przez wszystkie współpracujące laboratoria. Endogenne długołańcuchowe estry z tłuszczu mleka były również mierzone z dodatkiem palmitynianu retinylu. Kierownik badań zaleca, aby ta metoda oznaczania palmitynianu retinylu w płynnym mleku metodą LC została przyjęta jako pierwsze działanie.