Aglutinação – definição, reacções e aplicações
Última Actualização a 25 de Fevereiro, 2020 por Sagar Aryal
Aglutinação definição
Agglutinação é uma reacção antigénio-anticorpo na qual um antigénio particulado se combina com o seu anticorpo na presença de electrólitos a uma temperatura e pH especificados, resultando na formação de aglomeração visível de partículas. Ocorre de forma óptima quando os antigénios e os anticorpos reagem em proporções equivalentes. Esta reacção é análoga à reacção de precipitação, em que os anticorpos actuam como ponte para formar uma rede de anticorpos e as células que transportam o antigénio na sua superfície. Como as células são muito maiores do que um antigénio solúvel, o resultado é mais visível quando as células se agregam em aglomerados.
Quando os antigénios particulados reagem com anticorpos específicos, o complexo antigénio-anticorpo forma aglomerados visíveis sob PH e temperatura óptimos. Tal reacção é chamada aglutinação. Os anticorpos que produzem tais reacções são chamados aglutininas.
O que é a aglutinação?
Agglutinação é a expressão visível da agregação de antigénios e anticorpos. As reacções de aglutinação aplicam-se aos antigénios de teste de partículas que tenham sido conjugados a um portador. O transportador pode ser artificial (tais como látex ou partículas de carvão vegetal) ou biológico (tais como glóbulos vermelhos). Estas partículas conjugadas são reagidas com soro do doente, presumivelmente contendo anticorpos. O ponto final do teste é a observação de tufos resultantes da formação desse complexo antigénio-anticorpo. A qualidade do resultado é determinada pelo tempo de incubação com a fonte de anticorpos, quantidade e avidez do antigénio conjugado com o transportador, e condições do ambiente de teste (por exemplo, pH e concentração de proteínas). Vários métodos de aglutinação são utilizados na imunologia diagnóstica e estes incluem a aglutinação de látex, testes de floculação, aglutinação bacteriana directa, e hemaglutinação.
Aglutinação difere da reacção de precipitação, uma vez que a reacção de aglutinação ocorre na superfície da partícula envolvida, o antigénio deve ser exposto e ser capaz de se ligar com o anticorpo para produzir aglomerados visíveis. Nas reacções de aglutinação, são feitas diluições em série da solução de anticorpos e é adicionada uma quantidade constante de antigénio particulado às soluções de anticorpos diluídas em série. Após várias horas de incubação a 37°C, a aglomeração é registada por inspecção visual. O título do anti-soro é registado como o recíproco da diluição mais elevada que provoca a aglomeração. Uma vez que as células têm muitos determinantes antigénicos na sua superfície, o fenómeno do excesso de anticorpos é raramente encontrado.
Fenómeno de zona
O estado de excesso de anticorpos, no entanto, é chamado fenómeno de pró-zona. A uma concentração elevada de anticorpos, o número de epitopos é superado pelos sítios de ligação de antigénios. Isto resulta na ligação univalente de antigénios por anticorpos em vez de multivalently e assim, interfere na ligação cruzada de antigénios (formação de malha).
Occasionalmente, formam-se anticorpos que reagem com os determinantes antigénicos de uma célula mas não causam qualquer aglutinação. Inibem a aglutinação através dos anticorpos completos adicionados posteriormente. Tais anticorpos são chamados anticorpos de bloqueio. Os anticorpos anti-Rh e antibrucella são poucos exemplos de tais anticorpos de bloqueio.
Testes de aglutinação são fáceis de realizar e, em alguns casos, são os testes mais sensíveis actualmente disponíveis. Estes testes têm uma vasta gama de aplicações no diagnóstico clínico de doenças imunitárias não infecciosas e doenças infecciosas. As reacções de aglutinação têm uma grande variedade de aplicações na detecção tanto de antigénios como de anticorpos no soro e noutros fluidos corporais. São muito sensíveis e o resultado do teste pode ser lido visualmente com facilidade.
Aplicações das Reacções de Aglutinação
- Casamento cruzado e agrupamento de sangue.
- Identificação de Bactérias. Por exemplo, serotipagem de cólera Vibrio, serotipagem de Salmonella Typhi e Paratyphi.
- Diagnóstico serológico de várias doenças. Por exemplo, teste de recuperação rápida do plasma (RPR) para sífilis, teste de antistreptolisina O (ASO) para febre reumática.
- Detecção de antigénio desconhecido em várias amostras clínicas. Por exemplo, detecção do antigénio Vi de Salmonella Typhi na urina.
Outras leituras
- https://bio.libretexts.org/Bookshelves/Microbiology/Book%3A_Microbiology_(Boundless)/12%3A_Imunologia_Aplicações/12,2%3A_Immunoensaios_para_doença/12.2E%3A__Agglutinação_Reacções
- https://www.brainkart.com/article/Types-of-Agglutination-Reactions—Antigen-Antibody-Reactions_20188/
- https://iscnagpur.ac.in/study_material/dept_zoology/2.2_ANM_agglutination_reaction.pdf
- http://www.biosciencenotes.com/agglutination/
- http://microbiologyonlinenotes.com/agglutination/
- http://www.brainkart.com/article/Agglutination—Antigen-Antibody-Reactions_17920/